カナダでは，歴史的にみて，神経管欠損症の有病率が西部諸州よりも東部諸州で高く，1998 年に多様な穀類製品に対して葉酸添加が義務付けられた．カナダにおける，葉酸添加前後の神経管欠損症の有病率の変化を評価した．

研究対象集団には，1993～2002 年にカナダ 7 州に在住していた女性の生児出産，死産，胎児奇形による妊娠中絶を含めた．赤血球葉酸濃度の検査結果に関する報告に基づいて，研究期間を，添加前期間，部分的添加期間，全体的添加期間に分けた．各州における神経管欠損症のベースライン有病率と添加後の減少の程度との関連を評価した．

190 万件の出生において，計 2,446 例の神経管欠損症児が記録された．神経管欠損症の有病率は，添加前期間に出生 1,000 件あたり 1.58 例であったのが，全体的添加期間中には出生 1,000 件あたり 0.86 例となり，46%減少した（95%信頼区間 40～51）．減少の程度は，各州における添加前のベースライン有病率に比例し，添加開始後には地理的な差はほぼみられなくなった．観察された有病率の減少は，二分脊椎（53%の減少）が，無脳症（38%の減少）や脳ヘルニア（31%の減少）よりも大きかった．

カナダにおける食品への葉酸添加は，神経管欠損症の有病率の有意な減少と関連していた．その減少の程度は，ベースラインの有病率が高かった地域でもっとも大きかった．